Les tests de synthèse du cartilage

Le test CPII - Cartilage (auparavant appelé "C-propeptide du procollagène II")

(Fiche d'information en anglais seulement)

Applications cliniques

Ce test sérique permet de constater si la vitesse de synthèse des composantes du cartilage (collagène de type II) est perturbée, ce qui indique la présence d'arthrite rhumatoïde et d'arthrose.

Physiologie

Le procollagène est précurseur du collagène nouvellement formé. Les collagénases segmentent les terminaisons pour transformer le procollagène en collagène. Le test CPII mesure les terminaisons libérées lors de la formation de collagène.

Principe du test

Le test consiste en une compétition immunoenzymatique en deux étapes dans une plaque de 96 puits. Le propeptide CPII est immobilisé à la base des puits par incubation pendant la nuit, et le surplus éliminé par lavages successifs. Sur une autre plaque de préparation, des solutions étalons de CPII bovin ou des échantillons inconnus sont ajoutés, suivis d'un anticorps polyclonal de lapin anti-CPII. Le mélange est préincubé de manière à laisser l'anticorps se fixer au CPII libre. Ces échantillons sont ensuite transférés à la plaque ELISA et incubés pendant 2 heures sur un agitateur de manière à ce que l'anticorps se fixe soit au CPII immobilisé dans les puits, soit au CPII en solution. Après lavage des plaques, un anticorps de chèvre anti-lapin conjugué à la peroxydase de raifort (HRP) est ajouté. L'anticorps se lie à tout anticorps de lapin lié au CPII immobilisé dans les puits. Une solution de peroxyde contenant le chromogène tétraméthylbenzidine (TMB) est ajoutée. La peroxydase dégrade l'H 2 O 2 , entraînant l'oxydation du TMB pour former un produit de couleur bleue. La réaction est arrêtée et le signal amplifié au moyen d'un acide qui convertit du bleu au jaune le produit qui peut se quantifier par une lecture au spectrophotomètre à 450 nm. La densité optique à 450 nm est inversement proportionnelle à la quantité d'épitope.